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Princípio de detecção
Detecta o conteúdo total de NAD+ e NADH O etanol gera acetaldeído sob a ação da enzima. Enquanto isso, NAD+ é reduzido a NADH, NADH, sob a ação do transmissor de hidrogênio, transfere elétrons para WST-8 para produzir o produto amarelo, que tem um pico de absorção característico em 450 nm. Portanto, o conteúdo total de NAD+ e NADH pode ser quantificado medindo o valor de OD a 450 nm. Detectar NADH Depois de tratar a amostra, aqueça em banho-maria a 60oC por 30 min. o NAD+ da amostra é decomposto e apenas o NADH permanece. O NADH reduz o WST-8 para formar o produto amarelo, e a quantidade de NADH é determinada medindo o valor de OD a 450 nm. Detectar NAD+ e NAD+/NADH O conteúdo de NAD+ e a proporção de NAD+/NADH na amostra podem ser obtidos de acordo com o conteúdo total de NAD+ e NADH obtido nas duas primeiras etapas, bem como o conteúdo separado de NADPH. Observação: NADP+ e NADPH não afetam os resultados da determinação.
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