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Combo NGF/proNGF maduro (BEK-2214/2236), Rato, ensaio Rapid™ ELISA
DESCRIÇÃO
O kit Biosensis Rat Mature NGF/proNGF Combo RapidTM (ELISA) combina kits ELISA individuais, mas complementares, para as duas isoformas NGF mais importantes: Mature NGF (BEK-2214) e full-length proNGF (BEK-2236) .
Ambos os kits são ELISAs sanduíche, úteis para a quantificação de NGF maduro e proNGF em menos de 4 horas em sobrenadantes de cultura de células e homogeneizados de tecidos somente se usados conforme as instruções, com um protocolo simplificado e sem perda de sensibilidade ou especificidade. Consulte os protocolos de kit mais atuais para BEK-2214 (Mature BDNF RapidTM ELISA) e BEK-2236 (proNGF RapidTM ELISA), para obter instruções de uso específicas para cada aplicação de substrato.
O kit Mature NGF ELISA consiste em um anticorpo monoclonal anti-NGF de camundongo pré-revestido, um anticorpo de detecção anti-NGF biotinilado e estreptavidina conjugada com peroxidase de raiz forte (HRP). O kit proNGF ELISA consiste em um anticorpo de captura anti-proNGF pré-revestido, um anticorpo de detecção anti-NGF biotinilado e estreptavidina conjugada com peroxidase de raiz forte (HRP). A adição de um substrato (3,3',5,5'-tetrametilbenzidina, TMB) produz um produto de reação colorido que é diretamente proporcional à concentração de NGF maduro ou proNGF presente nas amostras e padrões de proteína. Um controle positivo de NGF e proNGF (amostra QC) é fornecido para garantir um desempenho consistente do ensaio.
O kit Mature NGF ELISA emprega uma proteína NGF de rato recombinante de alta qualidade como padrão e, portanto, o kit Mature NGF/proNGF Combo é projetado para medir as isoformas de NGF de rato. No entanto, o kit NGF ELISA maduro de rato apresentará reação cruzada com a proteína NGF madura de camundongo e humano. O kit proNGF ELISA contém um padrão recombinante de proNGF de camundongo expresso em E.coli. ProNGF de camundongo e proNGF de rato compartilham 96% de homologia de sequência, e os dados de validação interna demonstraram a capacidade do proNGF ELISA de detectar proNGF em lisados de células PC12 de rato e homogeneizado de tecido cerebral de rato. No entanto, o proNGF ELISA mostra apenas uma pequena reatividade cruzada (20%) com o proNGF humano.
Este kit Combo é capaz de distinguir e quantificar independentemente as isoformas de NGF maduro e NGF completo. Dados de validação interna demonstram que os anticorpos do ensaio ELISA de NGF maduro detectam preferencialmente a forma madura de NGF. A reação cruzada do proNGF completo foi < 0,1% quando analisado a 25 ng/mL em tampão de ensaio e não detectável quando analisado ao longo do intervalo de calibração de NGF maduro. Os anticorpos usados no kit proNGF ELISA ligam epítopos dentro do pró-domínio (captura) e domínio maduro (detecção) da proteína, portanto, o ensaio proNGF ELISA não detecta o peptídeo pró-domínio. Nenhuma reatividade cruzada é observada no kit proNGF ELISA com NGF de camundongo maduro e proBDNF completo quando testado em tampão de ensaio.
Este kit não foi testado para outras aplicações. Ele foi configurado apenas para uso em pesquisa e não deve ser usado em procedimentos diagnósticos ou clínicos.
Componentes do kit A caixa do kit ELISA contém 2 placas de tiras pré-revestidas de 96 poços por kit (1 x anticorpo NGF, 1 x placa revestida com anticorpo proNGF), padrões de proteína, amostra QC, reagentes de detecção, bloqueador de anticorpo heterófilo, tampão de lavagem e amostra, substrato buffer e protocolos detalhados.
INFORMAÇÃO
O fator de crescimento nervoso é importante para o desenvolvimento e manutenção dos sistemas nervoso simpático e sensorial. Estimula a divisão e diferenciação de neurônios sensoriais simpáticos e embrionários. SUBUNIDADE: Homodímero, associado por forças não covalentes. LOCALIZAÇÃO SUBCELULAR: Proteína secretada. SIMILARIDADE: Pertence à família NGF-beta.
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