Alopregnanolona - Kit ELISA, baseado em anticorpos monoclonais

MAIS SENSÍVEL - MULTIESPÉCIE

K061-H1 / K061-H5

A alopregnanolona ajuda na neurogênese e descobriu-se que reverte o déficit proliferativo de neurônios e os déficits cognitivos em modelo de camundongo da doença de Alzheimer. A alopregnanolona também demonstrou restaurar a funcionalidade em um modelo de camundongo da doença de Parkinson e melhorar os problemas comportamentais no transtorno de estresse pós-traumático.

A alopregnanolona (3a-hidroxi-5a-pregnan-20-ona) é um neuroesteróide presente no sangue e no cérebro. A alopregnanolona é produzida a partir de progesterona, que é convertida em 5α-di-hidroprogesterona pelas 5α-redutase tipo I. As isoenzimas da 3-hidroxiesteroide oxidoredutase convertem esse intermediário em alopregnanolona. Os 3α-hidroxiesteroides não interagem com os receptores esteróides intracelulares clássicos, mas ligam-se estereosseletivamente e com alta afinidade aos receptores do principal neurotransmissor inibitório no cérebro, ácido g-amino-butírico (GABA) 1. Enquanto a alopregnanolona, ​​como outros neuroesteróides ativos do receptor GABAA, como allotetrahydrodeoxycorticosterone, modula positivamente todas as isoformas do receptor GABAA, essas isoformas contendo subunidades δ exibem maior potenciação de magnitude. Pode estar envolvido na plasticidade neuronal, aprendizado, processos de memória, agressão, epilepsia, além da modulação das respostas ao estresse, ansiedade e depressão. A alopregnanolona possui propriedades farmacológicas semelhantes a outros moduladores positivos de Receptores GABAA, incluindo atividade ansiolítica e anticonvulsivante. Ansiedade e depressão são efeitos colaterais comuns dos inibidores da 5α-redutase, como finasterida e dutasterida, e acredita-se que sejam causados,em parte, pela inibição da produção endógena de alopregnanolona

O kit de imunoensaio DetectX® Allopregnanolone foi desenvolvido para medir quantitativamente a alopregnanolona presente em soro extraído, plasma, amostras fecais secas ou amostras diluídas de urina e meios de cultura de tecidos. Um padrão de alopregnanolona é fornecido para gerar uma curva padrão para o ensaio e todas as amostras devem ser lidas na curva padrão. Padrões ou amostras diluídas são pipetadas em uma microplaca revestida com um anticorpo para capturar anticorpos de camundongo. Um conjugado de alopregnanolona-peroxidase é adicionado aos padrões e amostras nos poços. A reação de ligação é iniciada pela adição de um anticorpo monoclonal à alopregnanolona em cada poço.

O kit possui duas opções de formato: uma incubação primária de duas horas em temperatura ambiente com agitação ou durante a noite a 4 ° C. No final do período de incubação, a placa é lavada e o substrato é adicionado. O substrato reage com o conjugado de alopregnanolona-peroxidase ligado. Após uma breve incubação, a reação é interrompida e a intensidade da cor gerada é detectada em um leitor de placas de microtitulação capaz de medir o comprimento de onda de 450 nm. A concentração da alopregnanolona na amostra é calculada, após a correção adequada para a diluição da amostra, usando o software disponível na maioria dos leitores de placas.