Fator de crescimento nervoso, pro- (proNGF), camundongo e rato, ensaio ELISA rápido.
DESCRIÇÃO
O Kit de ensaio imunoenzimático (ELISA) Mouse and Rat proNGF RapidTM é um ELISA sanduíche que permite a quantificação da proteína proNGF de comprimento total de roedores em menos de 4 horas em sobrenadantes de cultura celular e lisados celulares somente se usado conforme indicado. Consulte o protocolo do kit para obter instruções de uso específicas para cada aplicação de substrato.
Este kit ELISA contém um padrão proNGF recombinante de camundongo expresso em E.coli e consiste em um anticorpo de captura anti-proNGF pré-revestido, um anticorpo anti-detecção de NGF biotinilado e estreptavidina conjugada com horseradish peroxidase (HRP). A adição de um substrato (3,3',5,5'-tetrametilbenzidina, TMB) produz um produto reacional colorido que é diretamente proporcional à concentração de proNGF presente nas amostras e padrões proteicos.
Espera-se que este kit ELISA detecte proNGF de rato devido ao alto grau de homologia (96%) com proNGF de camundongo baseado em sequência de aminoácidos, e a capacidade deste kit em detectar proNGF em lisados celulares PC12 de ratos. Na ausência de um verdadeiro padrão proNGF para ratos, os resultados podem ser expressos como "equivalentes de proNGF em camundongos".
Este kit ELISA mostra apenas 20% de reatividade com a forma humana de proNGF e, portanto, não é adequado para quantificar o proNGF humano. Nenhuma reatividade cruzada foi observada com NGF de camundongo maduro e proBDNF de comprimento total quando testado em tampão de ensaio. Os anticorpos usados neste kit ELISA ligam-se a epítopos dentro do domínio pró-domínio (captura) e domínio maduro (detecção) da proteína, portanto, este ensaio de ELISA não detecta o peptídeo pró-domínio.
Este kit não foi testado para outras aplicações. Uma quantidade suficiente de padrão proNGF é fornecida para permitir experimentos de spike e recuperação, a fim de validar este ensaio ELISA para outras matrizes de amostra, se necessário. Este kit foi configurado apenas para uso em pesquisa e não deve ser usado em procedimentos diagnósticos ou clínicos.
Componentes do kit kit ELISA contém placa de tiras pré-revestidas de 96 poços, padrões de proteína, amostra de CQ, reagentes de detecção, bloqueador de anticorpos heterofílicos, tampões de lavagem e amostra, tampão de substrato e protocolos detalhados.
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