Veja abaixo, 6 dicas para plataforma Multiplex Luminex-xMAP, e use-a com sucesso.
Dica 1: use o mesmo tipo de amostra para seu estudo
O plasma é processado a partir do sangue total na presença de um anticoagulante. O soro é processado a partir do sangue total sem anticoagulante. As matrizes de amostras são diferentes para plasma e soro, portanto, conduza seu estudo com o mesmo tipo de amostra para garantir a continuidade dos dados. O mesmo se aplica a tecidos, cultura celular ou outros tipos de amostras.
Dica 2: verifique se você tem volume suficiente de amostra
A maioria dos nossos Ensaios
Multiplex -Luminex requerem um volume pequeno de amostra. Sempre garanta que sua alíquota tenha volume de amostra suficiente para o ensaio desejado. Sempre solicitamos um volume um pouco maior do que o solicitado no protocolo do kit, pois, fazemos a clarificação de suas amostras antes do ensaio. Se você tiver um volume de amostra menor do que o volume necessário, fale conosco, pois podemos projetar uma estratégia alternativa, garantindo que você receba os resultados de que precisa.
Dica 3: A preparação da amostra é fundamental para resultados confiáveis
A preparação deve ser sempre adequada para o tipo de amostra que será utilizada no ensaio e para a proteína que será dosada em seu estudo. Pontos a serem considerados são o tempo que você centrifuga as amostras, velocidade, temperatura e alíquotas. Como vários biomarcadores se degradam facilmente, recomendamos usar uma centrífuga refrigerada e manter suas amostras no gelo até que sejam aliquotadas e armazenadas em freezer. Evite deixar suas amostras na bancada à temperatura ambiente por períodos prolongados. Se você estiver processando soro ou plasma, faça uma alíquota limpa aspirando a parte do meio do sobrenadante, evitando o precipitado do fundo do tubo centrifugado e qualquer camada lipídica deve ser adequadamente removida. Para mais detalhes, solicite o nosso
Guia de Preparação de Amostras através do contato: leac@leaclab.com.br
Dica 4: Para matrizes complexas recomendamos um processo de filtração
Em primeiro lugar, a filtragem faz o ensaio funcionar com muito mais eficiência e precisão. As beads utilizadas no ensaio têm cerca de 5 μm de diâmetro; muitas partículas podem ter o mesmo tamanho e, assim, interferir com a aquisição do sinal ou os detritos celulares podem agregar as beads. Se você filtrar as amostras, esse problema será completamente resolvido na plataforma Luminex. Nem todas as amostras precisam ser filtradas - recomendamos para amostras com uma quantidade elevada de partículas, como homogeneizado de tecido.
Dica 5: siga sempre o protocolo de armazenamento recomendado
Seja consistente com o armazenamento de suas amostras, pois isso pode afetar a consistência na dosagem da amostra. Para a análise de citocinas, certifique-se de evitar múltiplos ciclos de degelo, pois isso diminuirá a estabilidade de certas citocinas na amostra. Certifique-se de preparar e congelar várias alíquotas da mesma amostra para uso único e congelamento a -70 ou -80 graus Celsius.
Dica 6: Em caso de dúvida, faça um estudo piloto
A menos que um protocolo descreva especificamente como analisar seu tipo de amostra, execute um estudo piloto para determinar a diluição ideal. Como os kits Luminex são caros, nunca assuma que suas amostras podem ser executadas sem diluição, a menos que o protocolo ofereça certeza.
Não possui adequação ou tempo para executar suas amostras? Deixe o LEAC ajudá-lo em sua pesquisa, envie suas amostras para o LEAC LAB!
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