O que há em um único microlitro de lágrimas de camundongos?

June 6th, 2017 / Hilary Graham

Níveis das citocinas IL-10, IL-12, IFNγ, TNF-α, e TGF-β

Muita informação pode ser extraída de um pequeno volume de amostra. Pesquisadores afiliados ao Programa de Pesquisa em Inflamação da Allergan, Inc., foram pioneiros em um método para avaliar os níveis de citocinas em lágrimas de ratos.

Um Resumo do Método

Os cientistas da Allergan descreveram o método na publicação: 2008 publication in Investigative Ophthalmology & Visual Science . Os autores colocaram 1,5 μL de tampão em cada olho do camundongo e coletaram 1 μL de lágrimas por ação capilar de cada olho usando um tubo capilar de vidro. As amostras de lágrimas foram então colocadas em 8 μL de tampão. Para cada ensaio multiplex, foram utilizados 10 μL de amostra de lágrima diluída (2 μL de lágrimas em 8 μL de tampão). Os cientistas Allergan estenderam seu trabalho em uma publicação de 2011 para demonstrar que as células apresentadoras de antígeno desempenham um papel no início da reação do olho seco experimental.

Cientistas que estudam a síndrome do olho seco e a imunorregulação na superfície ocular usaram esse método e o adaptaram para detecção de 25 citocinas e quimiocinas em amostras humanas. Trabalhos posteriores descobriram que a síndrome do olho seco é uma doença auto-imune de mucosa que resulta em inflamação crônica e danos nos tecidos.

Novas ferramentas para dosar citocinas em camundongos

Muitos pesquisadores na área de oftalmologia confiaram consistentemente nos painéis Millipore/Sigma para assim permitir o trabalho da síndrome do olho seco, como demonstrado nessas publicações:

A predictive model of ocular chronic graft versus host disease foi desenvolvido baseado em biomarcadores na lágrima. as developed based on tear biomarkers.
As baixas condições de umidade aumentam a atividade inflamatória e resultam em deterioração da função lacrimal.
Quercetina e resveratrol têm efeitos anti-inflamatórios e antioxidantes nas células conjuntivais e córneas.

Se você está trabalhando em um modelo de camundongo ou com amostras humanas, a Millipore/Sigma possui novos painéis de alta sensibilidade que permite um avanço em sua rotina de pesquisas.

O kit MILLIPLEX® map Mouse High Sensitivity T Cell Panel dosa níveis em picogramas de até 18 citocinas (GM-CSF, IFNγ, IL-1α, IL-1β, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-10, IL-12 (p70), IL-13, IL-17A, KC/CXCL1, LIX, MCP-1, MIP-2, TNF-α).

O kit MILLIPLEX MAP Human High Sensitivity T Cell Panel detecta até 21 citocinas e quimiocinas (Fractalkine, GM-CSF, IFNγ, IL-1β, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-10, IL-12 (p70), IL-13, IL-17A, IL-21, IL-23, ITAC, MIP-1α, MIP-1β, MIP-3α, TNF-α).

Ser capaz de medir baixos níveis de marcadores de proteínas inflamatórias é fundamental para compreender melhor a patogênese de muitos estados patológicos clínicos e subclínicos, como doenças auto-imunes, doenças cardiovasculares, diabetes, distúrbios neurológicos e câncer.